RT - Journal Article T1 - Cloning, expression, purification and the study of immunotherapy status of TGFαL3-SEB chimeric protein in breast cancer treatment JF - thums-jms YR - 2018 JO - thums-jms VO - 6 IS - 3 UR - http://jms.thums.ac.ir/article-1-528-fa.html SP - 13 EP - 25 K1 - SEB K1 - Staphylococcus aureus K1 - Cloning K1 - Immunotherapy K1 - Transforming Growth Factor alpha K1 - Breast Neoplasms AB - زمینه و هدف: سوپرآنتی­ژن های باکتریایی قادرند لنفوسیت های T را بدون توجه به اختصاصی بودن آنها تحریک کرده و سبب آزادسازی حجم وسیعی از سایتوکاین­ ها، از لنفوسیت­ های T و مونوسیت­ ها گردند در نتیجه آنها می ­توانند سیستم ایمنی بیمار را در جهت از بین بردن سلول های سرطانی فعال کنند. در این مطالعه برای اولین بار پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB از طریق اتصال ناحیه سوم فاکتور رشد اپیدرمی به انتروتوکسین تیپ B استافیلوکوکوس اورئوس طراحی و تولید گردید. بعلاوه فعالیت ضد توموری آن بر علیه رده سلول سرطان پستان انسانی مورد ارزیابی قرار گرفت. روش­ ها: پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB از طریق اتصال ژنتیکی انتهای آمینی tgfαl3 به انتهای کربوکسی seb با واسطه لینکر GGSGSGGG طراحی شد. حامل نوترکیب pET28a::tgfαl3-seb به میزبان بیانی اشرشیاکولی BL21(DE3) منتقل و به صورت یک پروتئین کایمریک بیان گردید. سپس فعالیت ضد توموری پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB بر روی رده سلولی سرطان پستان انسانی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: یافته ­های حاصله از طریق colony PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی تایید شد. پروتئین کایمریک با وزن مولکولی kDa 31 بیان، تخلیص و سپس از طریق آنالیز وسترن بلات تایید گردید. بررسی اثر ضدتوموری نشان داد. TGFαL3-SEB قادر است رشد سلولهای سرطان پستان را مهار کند. نتیجه ­گیری: نتایج نشان داد که پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB با موفقیت طراحی، بیان و تخلیص گردیده و احتمالا می­تواند به عنوان کاندید انتخابی ایمنوتراپی سرطان پستان مورد استفاده قرار گیرد. LA eng UL http://jms.thums.ac.ir/article-1-528-fa.html M3 ER -