TY - JOUR JF - thums-jms JO - VL - 6 IS - 3 PY - 2018 Y1 - 2018/12/01 TI - Cloning, expression, purification and the study of immunotherapy status of TGFαL3-SEB chimeric protein in breast cancer treatment TT - کلونینگ، بیان، تخلیص و بررسی وضعیت ایمنوتراپی پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB در درمان سرطان پستان N2 - زمینه و هدف: سوپرآنتی­ژن های باکتریایی قادرند لنفوسیت های T را بدون توجه به اختصاصی بودن آنها تحریک کرده و سبب آزادسازی حجم وسیعی از سایتوکاین­ ها، از لنفوسیت­ های T و مونوسیت­ ها گردند در نتیجه آنها می ­توانند سیستم ایمنی بیمار را در جهت از بین بردن سلول های سرطانی فعال کنند. در این مطالعه برای اولین بار پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB از طریق اتصال ناحیه سوم فاکتور رشد اپیدرمی به انتروتوکسین تیپ B استافیلوکوکوس اورئوس طراحی و تولید گردید. بعلاوه فعالیت ضد توموری آن بر علیه رده سلول سرطان پستان انسانی مورد ارزیابی قرار گرفت. روش­ ها: پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB از طریق اتصال ژنتیکی انتهای آمینی tgfαl3 به انتهای کربوکسی seb با واسطه لینکر GGSGSGGG طراحی شد. حامل نوترکیب pET28a::tgfαl3-seb به میزبان بیانی اشرشیاکولی BL21(DE3) منتقل و به صورت یک پروتئین کایمریک بیان گردید. سپس فعالیت ضد توموری پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB بر روی رده سلولی سرطان پستان انسانی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: یافته ­های حاصله از طریق colony PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی تایید شد. پروتئین کایمریک با وزن مولکولی kDa 31 بیان، تخلیص و سپس از طریق آنالیز وسترن بلات تایید گردید. بررسی اثر ضدتوموری نشان داد. TGFαL3-SEB قادر است رشد سلولهای سرطان پستان را مهار کند. نتیجه ­گیری: نتایج نشان داد که پروتئین کایمریک TGFαL3-SEB با موفقیت طراحی، بیان و تخلیص گردیده و احتمالا می­تواند به عنوان کاندید انتخابی ایمنوتراپی سرطان پستان مورد استفاده قرار گیرد. SP - 13 EP - 25 AU - Yousefi, Forough AU - Siadat, Seyed Davar AU - Aslani, Mohammad Mehdi AU - Imani-Fooladi, Abbas Ali AU - Nasiri, Omid AU - Mousavi, Seyed Fazlollah AD - Department of Bacteriology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran KW - SEB KW - Staphylococcus aureus KW - Cloning KW - Immunotherapy KW - Transforming Growth Factor alpha KW - Breast Neoplasms UR - http://jms.thums.ac.ir/article-1-528-fa.html ER -