fa مقایسه‌ی اثرات میدان الکترومغناطیس با فرکانس بسیار پایین و بتایین بر تمایز استخوانی سلول‌های بنیادی چربی انسانی در شرایط کشت آزمایشگاهی تخصصي Special پژوهشي Research <strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">میدان الکترومغناطیس با فرکانس بسیار پایین و بتایین از عوامل بی&shy;خطر در ترمیم شکستگی&shy;استخوان می&shy;باشند. هدف از این پژوهش مقایسه&shy;ی اثرات این دو محرک بر تمایز استئوژنیک سلول های بنیادی چربی انسانی (</span></span><span dir="LTR">hADSCs</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> بود.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">روش&shy; ها:</span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> سلول‌های بنیادی از چربی شکم پس از کسب رضایت کتبی، استخراج و تا پاساژ 3 کشت داده شدند.گروه&shy; های مورد مطالعه: سلول های کشت شده در محیط </span></span><span dir="LTR">&alpha;-MEM</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> و سرم (کنترل)، در محیط تمایز استخوان حاوی بتایین </span></span><span dir="LTR">10mM</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> (</span></span><span dir="LTR">BET+OD</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">)، در محیط </span></span><span dir="LTR">&alpha;-MEM</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> حاوی بتایین (</span></span><span dir="LTR">BET</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">)، در محیط تمایز استخوان و موج</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">با فرکانس </span></span><span dir="LTR">HZ</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">50 و شدت </span></span><span dir="LTR">mT</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">1(</span></span><span dir="LTR">OD+EMF</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">) و در موج به تنهایی (</span></span><span dir="LTR">EMF</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">بود.</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">تمایز استخوانی با مشاهده مورفولوژی سلول&shy;ها، رنگ‌آمیزی کمی و کیفی آلیزارین رد و ارزیابی میزان فعالیت آلکالین فسفاتاز بررسی شد. همچنین میزان بیان ژن&shy;های استئوژنیک (</span></span><span dir="LTR">RUNX2</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> و</span></span><span dir="LTR">OCN</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">) با </span></span><span dir="LTR">Real time PCR</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> ارزیابی شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتایج:</span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> افزایش معنی&shy;داری در میزان رسوبات کلسیمی، فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز و همچنین بیان ژن&shy;های </span></span><span dir="LTR">RUNX2</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR">OCN</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> در گروه </span></span><span dir="LTR">OD+BET</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> نسبت به گروه</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">های </span></span><span dir="LTR">BET</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> و</span></span><span dir="LTR">OD+</span> <span dir="LTR">EMF</span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;">&nbsp;مشاهده شد. در پایان روز 7 کاهش معنی&shy;داری در فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز در گروه </span></span><span dir="LTR">EMF</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> نسبت به گروه </span></span><span dir="LTR">OD+EMF</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> و گروه </span></span><span dir="LTR">BET</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> دیده شد. همچنین کاهش معنی&shy;داری در میزان بیان ژن </span></span><span dir="LTR">OCN</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> در گروه </span></span><span dir="LTR">EMF</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> نسبت به گروه </span></span><span dir="LTR">BET</span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> مشاهده گردید.</span></span><br> <strong><span dir="RTL"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه&shy; گیری:</span></span></span></strong><span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> در این تحقیق اثر سینرژیک بتایین و محیط تمایز استخوانی در تمایز استئوژنیک </span></span></span><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:11.0pt;">hADSCs</span></span><span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:12.0pt;"> تأیید شد و روش مناسبی است که می&shy;تواند در ترمیم شکستگی و مهندسی بافت کاربرد داشته باشد.</span></span></span><span dir="LTR"></span> <strong><em>Background & Aim</em></strong><em>:</em> Extremely low-frequency electromagnetic field (ELF-EMF) and betaine are safe factors in bone fracture repair. This study aimed to compare the effects of these two stimuli on osteogenic differentiation of human adipose stem cells (hADSCs).<br> <strong><em>Methods</em></strong><strong>:</strong> After obtaining written informed consent, cells were extracted from abdominal adipose tissue and then cultured in vitro until the third passage. Experimental groups were as follows: cells cultured in &alpha;-MEM and serum (control), in osteogenesis differentiation medium containing 10 mM Betaine (BET + OD), in &alpha;-MEM containing Betaine (BET), in OD and wave (50HZ and 1mT) (OD +EMF) and in the wave alone (EMF). Then, osteogenic differentiation was assessed by morphology, evaluating the qualitative and quantitative Alizarin red staining, alkaline phosphatase activity and real time PCR of RUNX2 and OCN genes.<br> <strong><em>Results</em></strong>: There was a significant increase in the formation of calcium deposits, alkaline phosphatase activity and also the expression of RUNX2 and OCN genes in OD + BET group compared to BET and OD + EMF groups. At the end of day 7, a significant decrease in alkaline phosphatase activity was observed in the EMF group compared to the OD + EMF and the BET groups. There was also a significant decrease in the expression of OCN gene in the EMF compared to the BET group.<br> <strong><em>Conclusion</em>:</strong> In this study, synergistic effect of betaine and EMF on osteogenesis of hADSCs was demonstrated and this could be used for fracture repair and tissue engineering. سلول‌های بنیادی مزانشیمی چربی انسانی, بتایین, میدان الکترومغناطیس, تمایز استئوژنیک Human adipose stem cells,Betaine,Electromagnetic field,Osteogenic differentiation 23 37 http://jms.thums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-962-1&slc_lang=fa&sid=1 Maryam Haji Ghasem Kashani مریم حاجی قاسم کاشانی kashani@du.ac.ir 100319475328460010867 100319475328460010867 Yes Damghan University, Faculty of Biology, Cellular & Molecular Department دانشگاه دامغان، دانشکده زیست شناسی، گروه علوم سلولی مولکولی Tayebeh Sadat Tabatabai طیبه سادات طباطبایی t.sadat69@gmail.com 100319475328460010868 100319475328460010868 No Damghan University, Faculty of Biology, Cellular & Molecular Department دانشگاه دامغان، دانشکده زیست شناسی، گروه علوم سلولی مولکولی